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產品簡稱：MCF-12A細胞
中文名稱：人乳腺上皮細胞

規(guī)格：瓶

種屬：人

來源：非致瘤性乳腺上皮細胞；女性

培養(yǎng)基：EMEM

狀態(tài)：貼壁

單位:

貨號：E0679

帛科細胞培養(yǎng)器材的選擇：從培養(yǎng)量大小來講，從小到大有細胞培養(yǎng)板、細胞反應管、搖瓶、細胞培養(yǎng)瓶、細胞工廠等，更大就是反應器了。

帛科細胞培養(yǎng)瓶培養(yǎng)面積從25-225平方厘米不等，一般都經過表面改性處理，適合細胞貼壁和生長。225ml 、175ml的多用于大規(guī)模培養(yǎng)時用（如單克隆細胞的培養(yǎng)等），75ml的多用于一般性細胞實驗用（一般性的傳代，保存細胞，為實驗提供細胞等），25ml一般是用來復蘇細胞或細胞較少時的培養(yǎng)，還有做原代細胞時也可以做多瓶而避免交叉污染。產品僅用于科研
細胞培養(yǎng)的具體步驟和注意事項：
1.細胞復蘇
將凍存細胞從液氮中取出后，在37℃水浴鍋內不斷搖動促進其融化。將融化的細胞移入離心管中，加入37oC預熱的DMEM完全培養(yǎng)基中（其中胎牛血清約為10%），輕輕吹勻，離心，500g離心2min，棄上清液。
加入DMEM完全培養(yǎng)基清洗，棄上清液。加入DMEM完全培養(yǎng)基，輕輕吹打混勻，制成細胞懸液，接種于培養(yǎng)皿/瓶中，在含5% CO2的細胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
2.細胞傳代
帛科細胞密度達到80%~90%（過量不足，過晚細胞狀態(tài)不佳，1:2至1:10以上的比率傳代培養(yǎng)，一般1:3至1:5細胞一代，即從細胞接種到分離再培養(yǎng)的一段時間，非細胞有絲分裂次數(shù)）時，去掉完全培養(yǎng)基，用1X PBS清洗2次。
加入胰蛋白酶（注意：消化液的量以蓋住細胞*，*消化溫度是37oC。顯微鏡下觀察細胞：倒置顯微鏡下觀察消化細胞，若胞質回縮，細胞之間不再連接成片，表明此時細胞消化適度）進行消化，放入細胞培養(yǎng)箱中約2-3min。 
加入適量DMEM完全培養(yǎng)基終止胰蛋白酶消化，轉移至離心管后500g離心2min，棄上清液，再加入DMEM完全培養(yǎng)基清洗，棄上清液。
加入DMEM完全培養(yǎng)基，輕輕吹打混勻，吸取10微升進行計數(shù)，然后按照所需細胞量在含5% CO2的細胞培養(yǎng)箱繼續(xù)培養(yǎng)。

3.細胞凍存
當細胞密度達到80%~90%時，去掉完全培養(yǎng)基，用1X PBS清洗2次。加入胰蛋白酶進行消化，放入細胞培養(yǎng)箱中約2-3min。加入DMEM完全培養(yǎng)基終止胰蛋白酶消化，轉移至離心管后500g離心2min，棄上清液，再加入DMEM完全培養(yǎng)基清洗，棄上清液。加入lml凍存液（90%胎牛血清，10% DMSO。 
一般來講血清含量可以在10%-90%之間調整，凍存液中加入血清一方面可以為細胞提供營養(yǎng)，另一方面可以在細胞凍存過程中提供非滲透性保護物質，如蔗糖，白蛋白等從而更好地保護細胞），放入凍存管內（管內有異丙醇，以保證溫度降低的速度），立即放入4oC冰箱中凍存30min，然后放入-20oC冰箱中凍存30min，再置于-80℃冰箱內過夜。
*天放入液氮中，可以保存至少兩年，如不放人液氮，可以保存三個月。 
細胞凍存和復蘇的原則是：慢凍速融，這樣更加有利于保持細胞的活力。凍存細胞不加任何保護劑，會導致細胞內冰晶的產生，從而使細胞產生內源性的機械損傷，引起細胞內環(huán)境滲透壓，PH，電解質等的改變，進而促使細胞死亡。
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HumanElastaseELISA試劑盒人彈性蛋白酶(Elastase)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T  1-(4-Fluorobenzyl)-2-chlorobenzimidazole  84946-20-3  中文名：  分子式：C14H10ClFN2 

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humanEchoVirusIgM,ECHOIgMELISA試劑盒人艾柯病毒IgM(ECHOIgM)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T  1,2,3-Triacetyl-5-deoxy-D-ribose  62211-93-2  中文名：  分子式：C11H16O7 

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香草醛（熔點標準品）   Vanillin  質量規(guī)格：熔點測定 小鼠谷酸脫羧酶自身抗體IgG(GAD-Ab-IgG)ELISA試劑盒 ，英文名： GAD-Ab-IgG ELISA Kit

環(huán)吡酮;環(huán)匹羅司  Ciclopirox  質量規(guī)格：>99%,BR 大鼠膜聯(lián)蛋白Ⅴ(ANX-Ⅴ)ELISA檢測試劑盒RatannexinⅤ,ANX-ⅤELISAKit 96T/48T

環(huán)吡酮;環(huán)匹羅司(標準品)  Ciclopirox  質量規(guī)格：HPLC>99%,標準品 人白細胞調節(jié)素(LR)試劑盒 Human leukoregulin,LR ELISA Kit
TEK Others Cynomolgus 食蟹猴 Tie2 / TEK 人細胞裂解液 (陽性對照) 磺胺甲惡唑（標準品）質量規(guī)格：HPLC>99%,標準品Sulfamethoxazole(SMZ)

人細胞;Hela硫酸頭孢匹羅質量規(guī)格：>760μg/MG,BR Cefpirome Sulfate

HEK-293細胞，Ad5DNA轉化的胚腎細胞 恒河猴胚腎細胞,FRhK-4細胞 CL-0251MC3T3-E1(小鼠胚胎成骨細胞前體細胞)5×106cells/瓶×2尼美舒利質量規(guī)格：>99%Nimesulide

A875(人色素瘤細胞) 5×106cells/瓶×2硝酸咪康唑質量規(guī)格：>99%Miconazole Nitrate

HBEpC-c 人上皮細胞(HBEpC) 500,000cells 主動脈內皮細胞Many types of cells包裝：5 × 105方(1ml)硝酸咪康唑(標準品)質量規(guī)格：>99%,標準品Miconazole Nitrate
MCF-12A細胞CL-0178OVCAR-3(人細胞)5×106cells/瓶×2藜蘆醛(>99%,BR)質量規(guī)格：>99%,BR3,4-Dimethoxybenzaldehyde

FZD5 Others Mouse 小鼠 Frizzled-5 / FZD5 CHO細胞裂解液 (陽性對照) 3-羥基苯(>98%,BR)質量規(guī)格：>98%,BR3-Hydroxybenzaldehyde

人前脂肪細胞-皮下裂解物HPA-s L間羥基肉桂酸(>98%,BR)質量規(guī)格：>98%,BR3-Hydroxycinnamic acid

小耳豬肺細胞;SEP-L1 癌細胞，MDA-MB-435S細胞 MA891細胞，小鼠癌細胞4,4-二羥基二苯砜(>98%,BR)質量規(guī)格：>98%,BR4,4-Dihydroxydiphenyl sulfone

人EB病毒轉化的B細胞;CGM12-溴代萘質量規(guī)格：>98%2-Bromonaphthalene
注意事項：
MCF-12A細胞（1）預熱培養(yǎng)用液：把已經配制好的裝有培養(yǎng)液、PBS和胰蛋白酶的瓶子放入37℃水浴鍋內預熱；
（2）用75%酒精擦拭經過紫外線照射的超凈工作臺和雙手；
（3）正確擺放使用的器械：保證足夠的操作空間，不僅便于操作而且減少污染；
（4）點燃酒精燈：注意火焰不能太小；
（5）嚴格的無菌操作；
（6）貼壁細胞消化適度：消化的時間受消化液的種類、配制時間、加入培養(yǎng)瓶中的量等諸多因素的影響，消化過程中應該注意培養(yǎng)細胞形態(tài)的變化，一旦胞質回縮，連接變松散，或有成片浮起的跡象就要立即終止消化；
（7）傳代細胞所有的操作盡量靠近酒精燈火焰。每次*只進行一種細胞的操作，每種細胞使用一套器材。避免交叉感染；
（8）傳代細胞瓶口每次打開或者關閉都需要在酒精燈上消毒。